### 1️⃣ 保存方法揭秘：传代培养保存法

传代培养保存法是一种最简单的短期保存技术，类似于将细菌放进一个“小旅馆”，并定期为其“更换房间”。在这种方法中，将菌种接种在固体斜面培养基上，并保存在4℃的冰箱中。然而，这种方法的保存时间较短，细菌可能会因环境变化而“闹脾气”甚至发生变异。此外，“旅馆”也容易受到“不速之客”的污染，普通细菌的保存时间大约为1个月，而假单胞菌则需每2周“换房间”一次。

### 液体石蜡覆盖保存法

液体石蜡覆盖保存法为细菌提供了一层“雨衣”，隔绝空气并防止水分蒸发。这种方法通过向斜面培养物中注入液体石蜡，使细菌在“雨衣”的保护下静静“睡觉”，保存时间可以延长至1-2年，某些霉菌、放线菌和芽孢细菌甚至可保存超过2年。这种方法在生物医疗领域中得到了广泛应用，尤其适合需要长期保存的微生物。

### 载体保存法

载体保存法的原理类似于让细菌坐在“小沙发”上，然后进行风干。通过将细菌附着在土壤、沙子、硅胶或滤纸等载体上，再进行干燥保存，这种方法特别适合那些会产生芽孢或孢子的细菌，保存时间可达2年。

### 冷冻保存法

冷冻保存法利用低温减缓细菌的新陈代谢，如同将它们置于“冰箱”中。这种方法包括在-20℃、-80℃的冰箱，以及-196℃的液氮中保存。其中，甘油管冷冻保存方法通过将菌种悬浮在甘油保护剂中，并放入冰箱进行保存，适合大多数微生物，保存时间可达数年。

### 冷冻干燥保存法

冷冻干燥保存法则是在极低温度下快速冷冻细菌，然后在减压下去除水分，仿佛为细菌进行了“真空包装”。这种方法可以确保细菌在长时间内保持活性，是生物医疗领域中常见的保存方式。液氮超低温保存法是一种高端的保存方式，通过将菌种悬浮在保护剂中放入-196℃的液氮中，从而实现长期保存，对大多数微生物十分有效。

### 2️⃣ 活化方法速速学

**传代培养保存法的活化**：直接从斜面培养基上挑取少量菌体，转接到新鲜的斜面培养基上，就像为细菌更换了“新家”。通常需要连续传代2-3次，细菌就会恢复活力。

**液体石蜡覆盖保存法的活化**：此法的活化步骤为，挑取少量菌体并转接到适宜的新鲜培养基上，待其生长繁殖后再转接一次，细菌便能“满血复活”。

**载体保存法的活化**：从载体中取出少量菌体，然后转接到合适的培养基上进行培养。例如，若菌种是通过沙土管保存，需将部分沙土粒转移至适宜的斜面培养基上，待其长出菌落后再转接一次。

**冷冻保存法的活化**：将冻存管从冰箱或液氮罐中取出，立即放入38℃-40℃的水浴中快速复苏，并适当摇动，直到内部结冰完全溶解为止。随后，将内容物移至适宜的培养基上进行培养。

**冷冻干燥保存法的活化**：首先，用75%酒精擦拭安瓿上部，随后将安瓿管顶部加热后用冷水让其破裂。然后用无菌水或培养液溶解菌块，转移至新鲜培养基中进行适温培养。

生物医疗领域的保存和活化方法日益成为重要的研究方向，**PG电子** 在这方面的应用不断扩展，致力于提供更高效、安全的微生物保藏解决方案，确保科研和医疗的顺利进行。