近年来，基因编辑技术的发展为生命科学研究带来了革命性的变化，尤其是CRISPR-Cas13 RNA靶向系统在基础和应用科学中的广泛使用，使其成为科研人员的重要工具。然而，哺乳动物细胞和小鼠模型中出现的旁切效应、体内靶向能力的待提升及效率不稳定等问题，限制了其在体内的应用。

新研究成果分享

近日，西班牙安达卢西亚发育生物学中心等研究团队在《Nature Communications》（影响因子166）上发表了一项重要研究，提出一套优化、经过验证的工具箱，显著提升了斑马鱼中RNA靶向CRISPR-Cas技术的潜力。这项研究为CRISPR-Cas技术在体内的应用开辟了新思路与方法，铺平了更广泛潜在治疗的道路。

研究背景

RfxCas13d是一种来自黄化瘤胃球菌的CRISPR-Cas RNA核酸内切酶，广泛应用于生物技术和医学领域。研究人员通过细胞内递送技术，优化了CRISPR-RfxCas13d技术，实现在斑马鱼、青鳉鱼和小鼠等动物胚胎中的有效瞬时RNA降解。但在此过程中，研究者识别出了一系列影响靶向效率的挑战，亟需解决。

研究亮点

该研究通过瞬时方法提出了多种互补的斑马鱼RNA靶向CRISPR-Cas技术的优化策略，包括cm-gRNA、NLS组合优化和IVT gRNA毒性筛查等。此外，研究还系统评估了RNA靶向的CRISPR-Cas技术，解决了靶向效率低、部分体外转录gRNA的毒性及核RNA靶向困难等问题，显著提升了在斑马鱼中进行RNA靶向研究的效率和适用性。

CRISPR-RfxCas13d技术优化

研究发现，通过化学修饰的gRNA（cm-gRNA）和优化的NLS组合，能够显著提高斑马鱼胚胎中基因表达后期的敲降效率。此外，利用计算模型预测gRNA活性，有助于在体内有效选择出高效的gRNA，从而优化CRISPR-RfxCas13d系统的应用。

生物医学开发的推动者

作为全球领先的生物技术服务提供者，PG电子致力于推动斑马鱼平台的应用与开发，借助先进的CRISPR-Cas技术，开展健康美丽产业CRO服务、科研服务和智慧实验室搭建等业务。PG电子目前已建立多个斑马鱼模型，包括胃癌、脑类器官和心脏类器官等，为生物医学研究提供强有力的支持。

总结

本研究通过多种优化策略显著提升了CRISPR-Cas13d在斑马鱼胚胎模型中的瞬时靶向RNA的效率、特异性和安全性，同时揭示了在靶向内源mRNA时其附带活性极低的特性。PG电子作为该领域的先锋，不断探索与开发创新技术，为生物医学的未来贡献力量。