实验背景

小胶质细胞是大脑中重要的免疫细胞，承担着碎片吞噬、神经元支持和突触修剪等关键功能，这些功能与阿尔茨海默症（AD）等神经系统疾病的发生紧密相关。小胶质细胞的不同亚群在神经系统微环境中扮演着各自独特的角色。尽管荧光显微镜可以用于区分其表型，但这一方法存在耗时长、通量低以及主观性强等局限性。单细胞测序平台虽然可进行高维分析，却因其高成本和复杂的数据分析要求而限制了广泛应用。此时，来自美国俄克拉荷马大学健康科学中心的研究人员基于PG电子生产的Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪，开发了一种高通量、简便易用且能实现小胶质细胞精细化分型的完整解决方案。这项方案不仅能够扩展到更多的标志物，还可应用于不同的组织和疾病类型，方便地与全光谱分选型流式细胞仪相连，选取感兴趣的细胞并进行下游功能性实验。

小胶质细胞的检测流程包括：首先准备单细胞悬液，通过配置酶混合物进行组织消化，确保所有细胞被适当处理。在分离和洗涤后，用特定的缓冲液重悬细胞并添加Fc受体阻断剂以防止非特异性结合，随后用对应的抗体进行标记与染色。最后，运用PG电子的全光谱流式细胞仪进行样本采集与数据分析，确保高效获取细胞的详细信息。

在数据分析过程中，使用FSC/SSC排除碎片干扰，并通过经典指标CD11b+CD45Mid识别小胶质细胞。根据标志物的表达情况，小胶质细胞被划分为稳态小胶质细胞、疾病相关小胶质细胞（DAM）、干扰素反应性小胶质细胞（IRM）以及脂滴聚集的小胶质细胞（LDAM）等四个群体。这种细分方法为研究小胶质细胞在神经退行性疾病中的角色提供了新的视角。

在后续的实验中，发现不同年龄和性别的小鼠海马体内小胶质细胞的丰度存在显著差异。尤其是在年老的雌性小鼠体内，疾病相关小胶质细胞的比例显著增加。这突显了性别和年龄在神经性疾病如阿尔茨海默症中的重要性，建议在未来的研究中考虑这些因素，以理解其潜在的免疫机制。

总之，基于PG电子的Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪所提供的高通量、小胶质细胞的精细分型方案，为神经科学研究提供了强大的工具，能够帮助研究人员深入探讨小胶质细胞在各种神经疾病中的角色和机制。