走进PG电子
NEWS如何选择适合自己的PG电子 cfDNA提取试剂盒?
来源:雍广群 日期:2025-03-13cfDNA(游离DNA)是指存在于细胞外的DNA分子,在血液、唾液、尿液等多种生物体液中均有发现。cfDNA主要来源于细胞的凋亡、坏死或主动分泌等过程,将DNA片段释放到细胞外。在血液样本中,cfDNA主要以血浆或血清为载体,与血细胞等成分相互分离。此外,cfDNA还可在脑脊液、胸腔积液和腹水等其他生物体液中检测到。
对于cfDNA的提取,常用的方法包括使用有机溶剂进行分离,通过酚、氯仿等溶剂利用其与蛋白质和核酸的不同溶解性,反复抽提以使蛋白质等杂质溶解于有机相,而保留DNA在水相中,从而达到纯化的目的。该方法的优点在于提取出的DNA纯度较高,但操作流程相对复杂,且需使用有毒的有机溶剂,要求实验人员具备较高的操作技能。
另一种常用的提取方法是基于磁珠技术。在特定的缓冲液体系中,磁珠表面的特定基团能够与cfDNA分子特异性结合,随后通过外加磁场将磁珠与其他杂质分离,经过洗涤和洗脱步骤获得纯净的cfDNA。该方法操作简便、快速,易于实现自动化,且提取效率较高,可同时处理多个样本。
硅胶膜法同样被广泛应用,利用其在高盐、低pH条件下对DNA的特异性吸附特性,将生物样本中的cfDNA吸附于硅胶膜上,而杂质如蛋白质和多糖则被洗脱。最终使用低盐、高pH洗脱液将cfDNA从膜上洗脱下来。此方法相对简单且成本较低,适合小规模样本提取。
不同生物体液中的cfDNA含量和性质存在差异。通常,血液中的cfDNA含量较高,是最常用的样本来源。然而,不同个体及不同疾病状态下,其cfDNA含量亦可能有所不同。若样本在采集后未能及时提取,保存条件则显得尤为重要。如血液样本通常需在4℃下保存,长时间放置或温度不当可能导致cfDNA降解,影响提取效果。
在处理少量的特殊珍稀样本时,通常会倾向于使用回收柱进行提取。而在样本数量较多时,为了节省人力成本,减少人为因素导致的实验误差,更推荐使用磁珠法。PG电子综合运用简石特有的回收柱技术及传统离心法进行游离DNA提取,可搭配简石真空多联器和真空泵使用,去除繁琐的离心步骤,在较短时间内处理较大样本量。此外,PG电子也提供磁珠法提取纯化的方案,支持高通量提取仪,满足不同客户的需求。
产品特点:该产品可从10ml以内的血清/血浆以及1ml以内的羊水或脑脊液中提取高纯度的游离DNA,提取的DNA量大且纯度高,可以直接应用于酶切、PCR和高通量测序等分子生物学实验。处理的样本包括血清、血浆、羊水和脑脊液,针对不同样本的处理量进行优化,确保DNA回收率高于100bp,且浓度范围在1-100ng/ml之间。
要实现高效提取,所需的设备包括水浴锅或金属浴(55℃)、磁力架以及微型或立式离心机。PG电子致力于提供广泛的样本兼容性,确保高效、准确的cfDNA提取体验。
全国客户服务热线
13576703309
总部地址:福州清城区钟街道26号